Author:
Суркова Р.С.,Каширских Д.А.,Собенин И.А.,Орехов А.Н.
Abstract
Целью исследования было определить эффективный аффинный сорбент для выделения белков, обладающих сиалидазной активностью, из сыворотки крови человека. Материалы и методы. Для получения белков, обладающих сиалидазной активностью, было использовано четыре аффинных сорбента: 1) иммобилизованная на агарозе трисиаловая кислота Neu5Ac(α2-8)Neu5Ac(α2-8)Neu5Ac, 2) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты (Neu5Acα)3 -C3-PAA-biot, 3) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты 5-amino-Neu2en, 4) иммобилизованный на агарозе дериват сиаловой кислоты 4-aminoNeu5Ac2en. Выделение белков, ответственных за десиалирование липопротеидов низкой плотности (ЛНП), проводили с помощью электрофореза в градиентном полиакриламидном геле. Результаты. Показано, что наиболее эффективно связывает белки, обладающие нейраминидазной активностью, сорбент с (Neu5Acα)3 -C3-PAA-biot. При проведении электрофореза полученных элюатов выделяются белки с молекулярной массой 65 и 116 кДа.
The aim of the study was to determine an effective affinity sorbent for isolating proteins with sialidase activity from human blood serum. Materials and methods. Four affinity sorbents were used to obtain proteins with sialidase activity: 1) Neu5Ac(α2-8)Neu5Ac(α2-8) Neu5Ac trisialic acid immobilized on agarose, 2) sialic acid derivative (Neu5Acα)3-C3-PAA-biot immobilized on agarose, 3) sialic acid derivative immobilized on agarose 5- amino-Neu2en, 4) agarose-immobilized sialic acid derivative 4-amino-Neu5Ac2en. Isolation of the proteins responsible for LDL desiallation was performed using gradient polyacrylamide gel electrophoresis. Results. The sorbent with (Neu5Acα)3 -C3-PAA-biot most effectively binds proteins with neuraminidase activity. During electrophoresis of the obtained eluates, proteins with a molecular weight of 65 and 116 kDa are isolated.
Publisher
Cifra Ltd - Russian Agency for Digital Standardization (RADS)
Reference6 articles.
1. Kong P., Cui Z., Huang X., Zhang D., Guo R., Han M. Inflammation and atherosclerosis: signaling pathways and therapeutic intervention. Signal Transduct. Target. Ther. 2022; 7(1): 131. DOI: 10.1038/ s41392-022-00955-7
2. Marchio P., Guerra-Ojeda S., Vila J.M., Aldasoro M., Victor V.M., Mauricio M.D. Targeting Early Atherosclerosis: A Focus on Oxidative Stress and Inflammation. Oxid. Med. Cell. Longev. 2019; 2019: 8563845. DOI: 10.1155/2019/8563845
3. Back M., Yurdagul A., Tabas I., Oorni K., Kovanen P. Inflammation and its resolution in atherosclerosis: mediators and therapeutic opportunities. Nat. Rev. Cardiol. 2019; 16(7): 389-406. DOI: 10.1038/ s41569-019-0169-2
4. Zhang C., Chen J., Liu Y., Xu D. Sialic acid metabolism as a potential therapeutic target of atherosclerosis. Lipids. Health. Dis. 2019; 18(1): 173. DOI: 10.1186/s12944-019-1113-5
5. Yang A., Gyulay G., Mitchell M., White E., Trigatti B. L., Igdoura S. A. Hypomorphic sialidase expression decreases serum cholesterol by downregulation of VLDL production in mice. J. Lipid. Res. 2012, 53(12): 2573–2585. DOI: 10.1194/jlr.M027300