Glukagon benzeri peptit-1'in yağ doku kaynaklı mezenkimal kök hücrelerinin kardiyomiyositlere dönüşmesi üzerindeki etkisi

Abstract

Amaç: Mezenkimal kök hücreler, çeşitli protokoller kullanılarak in vitro koşullarda kolaylıkla kardiyomiyositlere farklılaşabilir. Ancak bu protokollerde kullanılan ajanların hücre canlılığı üzerinde bazı olumsuz etkileri olduğu bildirilmiştir. Azasitidin mezenkimal kök hücreleri kalp kası hücrelerine farklandırmak için kullanılmaktadır. Bu çalışmanın amacı, bir GLP-1 reseptör agonisti olan Eksenatid'in insan yağ dokusu kaynaklı kök hücrelerinin kardiyomiyositlere farklılaşması ve canlılığı üzerindeki etkilerini araştırmaktır. Gereç ve Yöntem: Azasitidin ve Eksenatid'in insan yağ doku kaynaklı mezenkimal kök hücreler üzerinde hücre canlılığı ve proliferasyonu üzerindeki etkileri ile sitotoksisite testleri yapıldı. Farklılanma protokolü için, hücreler dört hafta boyunca Azasitidin ve Eksenatid ile inkübe edildi. Hücrelerin morfolojik değişiklikleri izlendi ve kardiyomiyojenik farklılaşma belirteçlerinin (cTnI, GATA4 ve MYH7) ekspresyonları immünohistokimyasal olarak değerlendirildi. Ayrıca kültürlerdeki kardiyak troponin I (cTnI) seviyeleri enzime bağlı immünosorbent testi kullanılarak ölçüldü. Veriler, tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve post-hoc testi ile değerlendirildi. Bulgular: İnsan yağ doku kaynaklı mezenkimal kök hücreler üzerine Azasitidin uygulaması, kontrole grubuna kıyasla hücre canlılığını önemli ölçüde azaltırken (%54.4) hücrelerin Azasitidin+Eksenatid ile uygulaması doza bağlı bir şekilde hücre ölümünü önledi. Azasitidin ve Eksenatid uygulanan hücreler, kardiyomiyojenik farklılaşma ile uyumlu önemli morfolojik değişiklikler ve kardiyomiyojenik belirteçlerde artış gösterdi. Ayrı ayrı ve birlikte uygulama yapılan gruplarda cTnI seviyeleri kontrole göre anlamlı derecede yüksek bulundu. Sonuç: Bu bulgular GLP-1 reseptör agonisti Eksenatid'in, Azasitidin uygulamasının neden olduğu hücre hasarını azaltarak İnsan yağ doku kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin kardiyomiyojenik farklılaşması üzerinde faydalı etkileri olabileceğini düşündürmektedir.