The in vitro effect of dexamethasone on maturation and differentiation of CD4CD45RO T-cells in rheumatoid arthritis

Abstract

Цель - исследование влияния глюкокортикоида дексаметазона (Dex) на процессы активации и генерации терминально-дифференцированных эффекторных CD4 Т-лимфоцитов (T) в культурах CD3CD45RO Т-клеток в условиях, имитирующих стимуляцию Т-клеточного рецептора in vitro в норме и при ревматоидном артрите (РА). Методика. Исследовали мононуклеарные лейкоциты (МНК) из венозной гепаринизированной крови 50 пациентов с ревматоидным артритом. Методом проточной цитофлюориметрии проанализировано изменение иммунофенотипа Т-лимфоцитов; иммуноферментным анализом оценена секреция CD3CD45RO Т-клетками цитокина IL-2; методом полимеразной цепной реакции определена экспрессия мРНК генов hTERT, U2af1l4 и Gfi1 в CD3CD45RO Т-клетках. Результаты. Полученные данные демонстрируют, что in vitro на фоне TCR-активации CD3CD45RO культур Т-клеток, Dex (в разной степени выраженности) участвует в формировании субпопуляции терминально-дифференцированных эффекторов (CD3CD4CD45ROCD28 T), характеризующихся низкой теломеразной активностью, потерей молекул костимуляции (CD28) и активации (CD25) и реэкспрессирующих высокомолекулярную изоформу рецептора CD45 - CD45RA в норме и у больных РА. Заключение. Сделано заключение, что популяция CD3CD4CD45ROCD28 лимфоцитов является ключевым участником в патогенезе РА, ускоренно приобретающая свой негативный потенциал на фоне глюкокортикоидной терапии, способствуя прогрессии заболевания, в частности, за счет мощного выброса провоспалительных медиаторов. Aim. To study the effect of dexamethasone (Dex) on activation and generation of terminally differentiated effector CD4 T-lymphocytes (TEMRA) in cultured CD3CD45RO T cells under the conditions mimicking stimulation of the T-cell receptor in vitro as it occurs in health and rheumatoid arthritis (RA). Methods. The study was performed on mononuclear leukocytes isolated from heparinized venous blood of 50 patients with rheumatoid arthritis. Changes in the T-lymphocyte immunophenotype were detected using flow cytofluorometry. Secretion of cytokine IL-2 by CD3 CD45ROT cells was assessed by ELISA. Expression of hTERT, U2af1l4, and Gfi1 gene mRNA in CD3CD45RO T cells was measured by polymerase chain reaction. Results. During the in vitro TCR activation of cultured CD3CD45RO T cells, Dex participated to a variable extent in formation of a subpopulation of terminally differentiated effectors (CD3CD4CD45ROCD28 TEMRA), which are characterized by low telomerase activity, loss of costimulation (CD28) and activation (CD25) molecules, and re-expression of the high molecular weight CD45-CD45RA receptor isoform both in healthy individuals and RA patients. Conclusion. The population of CD3CD4CD45ROCD28 lymphocytes is a key participant in the pathogenesis of RA by accelerating their negative impact during the glucocorticoid therapy. This lymphocyte population contributes to RA progression particularly due to the powerful discharge of proinflammatory mediators.