Oxidative stress and the content of antioxidative factors in THE isolated brain perfused USING A solution with A high oxygen tension

Abstract

Цель: оценить интенсивность перекисного окисления липидов и содержание антиоксидантных факторов в ткани изолированного головного мозга в условиях перфузии in situ раствором, не содержащим переносчиков О. Методика. Предложена оригинальная модель перфузии головного мозга крыс in situ раствором с повышенным напряжением кислорода без его переносчиков и без помещения препарата в барокамеру, т.е. при внешнем нормальном барометрическом давлении. Результаты. Выживаемость перфузируемого мозга (по критериям: - амплитуда электрокортикограммы не менее 35 мкВ и быстрый рост перфузионного давления более 60 мм рт. ст.) при давлении в оксигенационной камере 900 мм рт. ст. и 2400-2600 мм рт. ст. составляли более 3 ч и 4 ч соответственно. Установлено, что при напряжении кислорода в перфузионном растворе, равном 2400-2600 мм рт. ст., содержание перекисей липидов и диеновых конъюгатов в ткани мозга не превышает нормальных значений или даже ниже, чем при перфузии мозга раствором с напряжением кислорода 970 мм рт. ст. В этих условиях содержание в мозге, витамина Е и SH-групп белков не изменяется. Таким образом, при напряжении кислорода в 2400-2600 мм рт. ст. в перфузионном растворе признаки оксидативного стресса в мозге отсутствуют. Заключение. Предлагаемая методика перфузии головного мозга крыс in situ обеспечивает его функционирование без переносчиков кислорода в условиях нормального внешнего барометрического давления, такое же, как и при использовании перфузии с переносчиками кислорода. Данный метод представляет собой удобную и экономичную модель для исследования функций изолированного мозга. The aim. To evaluate intensity of lipid peroxidation and content of antioxidative factors in the isolated brain perfused with a solution without oxygen carriers. Methods. We used an original model of in situ rat brain perfusion using a solution with a high oxygen tension. Neither O carriers nor a barometric chamber were used, i.e., the brain was perfused under normal external barometric pressure. Results. Survival time of the perfused brain (criteria: electrocorticogram amplitude >35 mV and rapid elevation of the perfusion pressure to >60 mm Hg) at the oxygenation chamber pressure of 900 mm Hg and 2400-2600 mm Hg was 3 h and 4 h, respectively. At the O tension of 2400-2600 mm Hg in the perfusion solution, contents of lipid peroxides and conjugated dienes in the brain were not higher or even lower than at the perfusion solution O tension of 970 mm Hg, while the content of ascorbic acid was slightly increased and contents of vitamin E and protein SH-groups were not significantly changed. Therefore, at the O tension of 2400-2600 mm Hg in the perfusion solution, there were no signs of oxidative stress in the brain tissue. Conclusion. The proposed model of in situ brain perfusion provides the brain functioning under normal external barometric pressure without oxygen carriers similar to perfusion with oxygen carriers. This method represents a suitable and simple model to study functions of the isolated brain.