Effect of anaferon for children on the life cycle of influenza virus A/H1N1

Abstract

Цель исследования - изучение возможного прямого влияния препарата «Анаферон детский» на жизненный цикл вируса гриппа А в процессе развития инфекции, а также дозозависимости противовирусного эффекта in vitro . Методика. Исследование противовирусной активности препарата «Анаферон детский» in vitro было проведено с использованием культуры клеток MDCK (Madin Darby canine kidney) и эталонных штаммов вируса гриппа A (H1N1) pdm09: A/California/07/09 и А/California/04/09, полученных от ВОЗ. Использовались методы оценки подавления Анафероном детским вирусной репликации (по результатам иммуноферментного анализа по определению экспрессии внутренних белков NP и M1 вируса гриппа А) и его влияние на ультраструктурные особенности морфогенеза вируса гриппа методом электронной микроскопии. В качестве положительного контроля был использован Озельтамивир карбоксилат в концентрации 10 мкМ. Для мониторинга валидности экспериментальной модели в работе использовали клетки, зараженные вирусом без добавления экспериментальных образцов (контроль вируса), а также интактные клетки (клеточный контроль). Результаты. В ходе исследования показан дозозависимый противовирусный эффект препарата «Анаферон детский» для 3 тестируемых разведений - 1/8, 1/12, 1/16. Методом электронной микроскопии показано, что применение препарата «Анаферон детский» при сравнении с контрольным образцом влияло на процесс почкования вирионов. Заключение. Впервые показана дозозависимость противовирусного действия препарата «Анаферон детский», а также подтверждена его эффективность в отношении двух штаммов вируса пандемического гриппа А/H1N1. Документировано, что применение препарата «Анаферон детский» нарушает жизненный цикл вируса гриппа А. Механизмы развития такого эффекта требуют дополнительного изучения, однако можно предположить их связь с ИФН-индуцирующими свойствами препарата «Анаферон детский», так как было показано, что в начале лечения вирусной инфекции препарат вызывает индукцию синтеза белков системы интерферонов. The aim of this study was to evaluate a possible direct effect of Anaferon for Children on the life cycle of influenza A virus during infection development and a dose response of the antiviral effect in vitro. Methods. The in vitro antiviral activity of Anaferon for Children was studied on cultured MDCK cells and reference strains of influenza virus A (H1N1) pdm09: A/California/07/09 and A/California/04/09, both from the WHO. Inhibition of viral replication by Anaferon for Children and its effect on ultrastructural features of the influenza morphogenesis were evaluated using electron microscopy. Results. The study demonstrated a dose dependence of Anaferon for Children antiviral activity for three dilutions - 1/8, 1/12, and 1/16. Anaferon for Children affected the process of virion budding as compared to placebo. Conclusion. The study showed that the anti-influenza action of Anaferon for Children was dose-dependent and confirmed that this drug was effective against two strains of pandemic A/H1N1 influenza. Furthermore, Anaferon for children disrupted one or several stages of the virus life cycle.