Screening test for determination of multiple-modified lipoproteins of low density - marker of subclinical atherosclerosis

Abstract

Разработан скрининг-тест для определения множественно-модифицированных липопротеинов низкой плотности (ммЛПНП) в сыворотке крови для рутинных исследований. Инкубация сыворотки в буфере, содержащем 9,1% поливинилпирролидона 35000 (ПВП-35) приводит к полной агрегации ммЛПНП. Патогенность выделенных ммЛПНП подтверждена в тестах связывания системы комплемента и литической активности in vitro , а также в тесте сосудистой дистонии у крыс in vivo . Предлагаемый способ отличается высокой производительностью и низкой себестоимостью. Метод включает 2 операции - смешивание сыворотки с раствором 10% ПВП-35 в 96-луночных иммунологических планшетах, инкубация в течение 10 мин при комнатной температуре и турбидиметрия при 450 нм на ИФА-ридере. Проведены исследования взаимосвязи концентрации ммЛПНП в сыворотке крови и толщины комплекса интима-медиа по данным ультразвукового дуплексного сканирования сонных артерий у 78 человек с низким сердечно-сосудистым (SCORE <1%) и низким кардио-метаболическим рисками (CMDS 0-1). Из всех фракций липидного спектра крови ммЛПНП показали самый высокий коэффициент корреляции с показателями субклинического атеросклероза, что подтверждает высокий атерогенный потенциал ммЛПНП. A screening test was developed to determine multiply-modified low-density lipoprotein (mmLDL) in serum for routine studies. Incubation of serum in a buffer containing 9.1% polyvinylpyrrolidone 35,000 (PVP-35) results in complete aggregation of mmLDL. Pathogenicity of isolated mmLDL was confirmed during binding tests of the complement system and lytic activity in vitro , and also in vascular dystonia test with rats in vivo . The proposed method is characterized by high productivity, low cost, includes 2 operations - mixing serum with a solution of 10% PVP-35 in 96-well immunoassay plates, incubating for 10 min at room temperature and turbidimetry at 450 nm on an ELISA reader. A study was made to determine relationship between concentration of mmLDL in the blood serum and thickness of the intima-media complex from data of ultrasound duplex scanning of carotid arteries with 78 people with low cardiovascular risk (SCORE <1%) and low cardiovascular risk (CMDS 0-1). Of all fractions of the lipid spectrum of the blood, mmLDL showed the highest correlation coefficient with the indices of subclinical atherosclerosis, which confirms high atherogenic potential of mmLDL.