1. Hình 1: Củ tỏi (Allium sativumL.)
2. 2,2 diphenyl-1picrylhydrazine (DPPH), Bovine serum albumin (BSA), Folin-Ciocalteu reagent và vitamin C (VTMC) được mua từ công ty Sigma-Aldrich, Hoa Kỳ. Các hóa chất còn lại là loại đạt tiêu chuẩn dùng cho phân tích hóa học, được mua từ công ty Loba Chemie, Ấn Độ và công ty Wako, Nhật Bản.
3. Thí nghiệm ảnh hưởng của chiết xuất với sự hỗ trợ của sóng siêu âm và điều kiện chiết xuất (loại dung môi, tỷ lệ nguyên liệu/dung môi, thời gian chiết, nhiệt độ chiết và số lần chiết) đến hoạt tính chống oxy, hàm lượng các hợp chất phenol tổng số và flavonoid tổng sốcủa dịch chiết từ củ tỏiđược tiến hành như sau:
4. Mỗi mẫu thí nghiệm lấy 50 gam củ tỏi đã được cắt nhỏ đem đi đồng hóa với 100ml dung môi (nước cất hoặc ethanol 99,5%) trong 120 giây, hỗn hợp sau khi đồng hóa được bổ sung thêm dung môi cho đạt tỷ lệ nguyên liệu/dung môi là 1/10 (g/ml) đem chiết xuấtchất chống oxy hóa. Mẫu chiết xuất với sự hỗ trợ của sóng siêu âmtần số 37KHztrong thời gian 10 phút ở 10 ± 2oC, mẫu chiết xuất không có sự hỗ trợ của sóng siêu âmđược tiến hành theo phương pháp ngâm chiết trong thời gian 10 phút ở 10 ± 2oC. Sau đó đưa ly tâm ở 4◦C trong 10 phút với vận tốc 3.000 vòng/phút. Sau khi ly tâm, tách lấy dịch và lọc qua giấy lọc Whatman số 1, bổ sung dung môi vào dịch lọc cho đủ 500 ml dịch chiết. Các mẫu dịch chiết được giữ ở nhiệt độ trong khoảng 1-4◦C dùng để phân tích xác định ảnh hưởng của chiết xuất với sự hỗ trợ của sóng siêu âm đến hoạt tính chống oxy hóa, hàm lượng các hợp chất phenol tổng số và flavonoid tổng sốcủa dịch chiết từ củ tỏi.
5. Mỗi mẫu thí nghiệm lấy 50 g củ tỏi đã được cắt nhỏ đưa đi đồng hóa với 50 ml dung môi, các loại dung môi khảo sát gồm: nước cất, ethanol 20%, ethanol 40%, ethanol 60%, ethanol 80% và ethanol 99,5%. Hỗn hợp sau khi đồng hóa được bổ sung thêm dung môi cho đạt tỷ lệ nguyên liệu/dung môi là 1/10 (g/ml), chiết xuất với sự hỗ trợ của sóng siêu âm tần số 37 KHz trong thời gian 10 phút ở 10 ± 2oC. Tiếp theo, các bước thực hiện giống như mục 2.1 . Dựa vào kết quả phân tích chọn dung môi thích hợp cho chiết xuất hoạt chất chống oxy hóa từ củ tỏi trong các thí nghiệm tiếp theo.