Issledovanie teplovogo vozdejstviya femtosekundnyh lazernyh impul'sov na embriony myshi v ramkah procedury vspomogatel'nogo hetchinga

Abstract

Odnoj iz prichin besplodiya yavlyaetsya narushenie hetchinga — processa vylupleniya embriona iz special'noj zashchitnoj obolochki (ZP, zona pellucida,) neposredstvenno pered implantaciej. CHasto narushenie hetchinga obuslovleno uplotneniem ili utolshcheniem ZP. Dlya preodoleniya besplodiya v takih sluchayah pribegayut k procedure vspomogatel'nogo lazernogo hetchinga, kogda s pomoshch'yu lazera v ZP delayut otverstie, oblegchaya vyhod embriona iz nee. Vopros bezopasnosti primeneniya lazera dlya provedeniya procedury vspomogatel'nogo hetchinga ostaetsya otkrytym, poskol'ku lazernoe izluchenie sposobno nagrevat' okruzhayushchuyu sredu i potencial'no vyzyvat' u embrionov termicheskij shok. Cel'yu nastoyashchej raboty bylo ocenit' bezopasnost' femtosekundnogo lazernogo vozdejstviya na embriony myshi v ramkah procedury vspomogatel'nogo hetchinga, ispol'zuya metody issledovaniya zhiznesposobnosti embrionov i urovnej ekspressii genov HSP. Dlya dissekcii ZP v rabote ispol'zovali novyj tip istochnika lazernyh impul'sov femtosekundnoj dlitel'nosti. Energiya ukazannyh impul'sov na dva poryadka nizhe energii millisekundnyh lazernyh dissektorov, primenyaemyh v klinikah v nastoyashchij moment. Dlya ocenki femtosekundnogo lazernogo vozdejstviya na embrion proizvodili okrashivanie embrionov domovoj myshi (Mus musculus) fluorescentnymi krasitelyami, a takzhe ocenivali urovni ekspressii genov, kodiruyushchih belki teplovogo shoka: Hsp90aa1 i Hspa5. Posle vypolneniya procedury vspomogatel'nogo lazernogo hetchinga s ispol'zovaniem femtosekundnogo lazera kletki embrionov sohranyali zhiznesposobnost', a urovni ekspressii genov, kodiruyushchih belki teplovogo shoka, povyshalis' neznachitel'no po sravneniyu s gruppoj otricatel'nogo kontrolya (p = 0,408).