Ekspressiya faktora ATOH1 induciruet bystruyu differencirovku iPSK v nejronnom napravlenii

Abstract

Izuchenie inducirovannyh plyuripotentnyh stvolovyh kletok cheloveka (iPSK) i sozdanie tekhnologij ih prakticheskogo ispol'zovaniya — odno iz samyh naukoemkih napravlenij sovremennyh biomedicinskih issledovanij. Nesmotrya na potencial primeneniya iPSK v personalizirovannoj medicine i v sozdanii kletochnyh modelej zabolevanij razlichnoj etiologii, ispol'zovanie iPSK ostaetsya krajne slozhnym. Tak, mezhkletochnaya geterogennost' iPSK pri otsutstvii effektivnyh sposobov opredeleniya identichnosti i ocenki sushchestvenno zatrudnyaet vosproizvodimost' podobnyh issledovanij. Cel'yu raboty bylo sozdat' liniyu iPSK, nesushchuyu gen transkripcionnogo faktora ATOH1 pod kontrolem sistemy indukcii ekspressii Tet-One, gen fluorescentnogo belka TagBFP i gen ustojchivosti k puromicinu dlya selekcii kletok. V rabote ispol'zovali metody molekulyarnogo klonirovaniya, lentivirusnuyu transdukciyu, kul'tivirovanie kletok, immunofluorescentnoe okrashivanie i fluorescentnuyu mikroskopiyu. Sozdannaya kletochnaya model' pozvolit analizirovat' sostoyanie edinichnyh kletok i, sledovatel'no, imeet bol'shoj prakticheskij potencial kak dlya laboratornyh, tak i dlya medicinskih issledovanij.