Affiliation:
1. Институт биохимии им. А.Н. Баха, Федеральный исследовательский центр “Фундаментальные основы биотехнологии” РАН
2. Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Abstract
Предложено применение наночастиц золота (НЧЗ) в качестве носителей для снижения предела обнаружения поляризационного флуоресцентного (ПФ) аптамерного анализа. ПФ-анализ основывается на различиях флуорофора, конъюгированного с аналитом и облучаемого плоскополяризованным светом, по степени деполяризации излучаемого света до и после связывания аналита с рецептором. Применение аптамеров в качестве рецепторов в таком анализе ограничено из-за их небольшой молекулярной массы и соответственно недостаточного влияния на поляризацию. Данное ограничение может быть устранено посредством включения аптамеров в крупные межмолекулярные комплексы. Показаны преимущества НЧЗ как унифицированного, стабильного и легкомодифицируемого носителя для аптамеров. ПФ-аптамерный анализ реализован с применением НЧЗ, имеющих средний диаметр 8.7 нм, и охратоксина А (ОТА) в качестве целевого аналита. Анализ апробирован для тестирования проб белого вина. Достигнутый предел обнаружения ОТА — 2.3 мкг/кг, что в 25 раз ниже, чем при использовании нативного аптамера. Продолжительность анализа — 15 мин. Предлагаемый подход может применяться для аптамерного анализа различных низкомолекулярных соединений.