Frecuencia de espermatozoides con activación de caspasas 3/7 obtenidos de epidídimo de alpaca analizados mediante citometría de flujo

Abstract

El estudio tuvo como objetivo determinar la proporción de células espermáticas de alpaca (Vicugna pacos) con caspasas-3/7 de forma activada. Se emplearon los epidídimos de 23 pares de testículos obtenidos del Camal Municipal de Huancavelica, Perú. En el laboratorio se empleó un dilutor (leche libre de grasa, yema de huevo y fructuosa) para la obtención de las células espermáticas de la parte caudal del epidídimo. Las células fueron sometidas a dos lavados con 1 mL de PBS y centrifugados. Al producto se le agregó 100 µL de CellEvent™ Caspasa 3/7 Green Detection Reagent y se incubó a 37.5 °C durante 30 min, mientras que 0.5 µL de Ioduro de Propidio fue agregado 10 minutos antes de finalizar la incubación, como marcador de muerte celular. La lectura se hizo mediante citometría de flujo. La media ± desviación estándar de células espermáticas con activación de caspasas 3/7 fue de 36.21 ± 11.25%, intervalo de confianza de 31.34 a 41.08% y un coeficiente de variación de 31.07%. Los datos presentaron una distribución normal de acuerdo con la prueba Kolmogorv-Smirnov. Las correlaciones entre espermatozoides con caspasas 3/7 activada con el peso y volumen del testículo y con la motilidad y concentración espermática no fueron significativas. Se estima entre 31 a 41% de espermatozoides epididimarios de alpaca se encuentran en proceso de apoptosis.