Carrier detection in families affected by Duchenne/Becker muscular dystrophy

Abstract

A Duchenne-/Becker-izomdystrophia súlyos, X-kromoszómához kötött, recesszív neuromuscularis betegség, amelynek előfordulási gyakorisága 1/3500 (Duchenne-típus) és 1/30000 (Becker-típus). A betegség kialakulásáért felelős gént az Xp21-es régióban lokalizálták, amelynek terméke a 427 kD nagyságú dystrophinfehérje. Deletiókat, pontmutációkat és ritkán duplikációkat a teljes génben detektáltak, ami megnehezíti a diagnosztikát. Multiplex polimeráz láncreakció az érintett férfiak 95%-ában kimutatja a deletiót, de nem alkalmas a hordozóság detektálására. Southern-blot-analízissel, 6 cDNS-próbával a teljes 14 kb nagyságú dystrophin-gént kódoló szekvencia analizálható, és a különböző exonokhoz tartozó radioaktív jelek intenzitásának meghatározásával a hordozósági állapot is vizsgálható. A Southern-blot-analízis idő- és anyagigényes, összehasonlítva a multiplex ligációfüggő próbaamplifikációs módszerével, amely lehetővé teszi több DNS-szekvencia relatív mennyiségének meghatározását egyetlen reakcióban. Kilencvenhárom női hozzátartozó hordozósági státuszát vizsgálták Southern-blot- és multiplex ligációfüggő próbaamplifikáció analízissel összehasonlítva. Negyvenkét esetben (45%) igazolták mind a két módszerrel a hordozósági státuszt. Érdekességként, a hordozó populációban két esetben detektáltak duplikációt, két másik esetben pedig a női rokonok hordozónak bizonyultak a teljes dystrophingén hiánya tekintetében. Három további leánybeteg bizonyult hordozónak, klinikai tünetekkel (manifest carrier). A szerzők tapasztalatai alapján a multiplex ligációfüggő próbaamplifikáció analízise a Duchenne-/Becker-izomdystrophia-betegség hordozóságának szűrésében gyors és megbízható módszernek bizonyul, valamint alkalmas az érintett férfiak deletioméretének pontos meghatározására is. A pontos deletiós vagy duplikációs méret ismeretében a fenotípusra is előrejelzés adható, amely a jövőbeli terápiás eljárás kiválasztásához is segítséget nyújthat.