L-Askorbik asit (C vitamini) Tayinine Yönelik Kalem Grafit Elektrot-Askorbat Oksidaz Temelli Yeni Bir Biyosensör Geliştirilmesi

Abstract

Bu çalışmada, biyosensör teknolojisi için özgün ve yeni bir bakış açısı katmak maksadıyla PGE kullanılarak L-askorbik asit analizi için yeni bir sensör geliştirilmiştir. Askorbat oksidaz enzimi glutaraldehid ve jelatin kullanılarak çapraz bağlanmış, kalem grafit elektrot yüzeyinde tutturulmuştur ve geliştirilen biyosensör L-askorbik asit tayini için kullanılmıştır. Ölçümler amperometrik yöntem kullanılarak tüketilen oksijen miktarı ile orantısal akım değerlerindeki azalmanın belirlenmesi ile yapılmıştır. Tasarlanan biyosensör ile L-askorbik asit ölçümleri -0.7 V’ta amperometrik yöntem ile gerçekleştirilmiştir. Optimizasyon çalışmalarından PGE/jelatin- glutaraldehit/askorbat oksidaz modifiye biyosensör için askorbat oksidaz konsantrasyonu, glutaraldehitte bekletme süresi, jelatin miktarı, ve glutaraldehit tabakalandırma sayısı sırasıyla 1,5 U/mL, 3 dakika, 20 mg ve 3 kez olarak analiz edilmiştir. Kullanılan Potasyum fosfat tamponu (pH:7, 50 mM) ve 30°C’de optimum çalışma koşullarını sağladığı belirlenmiştir. PGE/jelatin- glutaraldehit/askorbat oksidaz biyosensörü için karakterizasyon çalışmalarında doğrusal tayin aralığı 25µM - 500µM bulunmuştur. Sonuçlarına ilişkin olarak % varyasyon katsayısı (V.K) = 0,44 ve standart sapma (S.S) = ±1,46 µM olarak belirlenmiştir. Depolama kararlılığına ilişkin yapılan denemeler sonucunda 4 haftalık sürecin sonunda %75’lik aktivitenin korunduğu tespit edilmiştir.