Synthesis and characterization of 3H-labelled tetrahydrobiopterin

Author:

Werner E R1,Schmid M1,Werner-Felmayer G1,Mayer B1,Wachter H1

Affiliation:

1. Institut für Medizinische Chemie und Biochemie, Universität Innsbruck, Fritz-Pregl-Str.3, A-6020 Innsbruck, Austria, and Institut für Pharmakologie und Toxikologie, Universität Graz, Universitätsplatz 2, A-8010 Graz, Austria

Abstract

We synthesized [3′-3H]-5,6,7,8-tetrahydrobiopterin from [8,5′-3H]guanosine 5′-triphosphate ([8,5′-3H]GTP) using GTP cyclohydrolase (EC 3.5.4.16), 6-pyruvoyltetrahydropterin synthase and sepiapterin reductase (EC 1.1.1.153). After purification by cation-exchange h.p.l.c. a solution of radiochemically pure (> 95%) [3′-3H]-5,6,7,8-tetrahydrobiopterin with a specific activity of 9.2 Ci/mmol was obtained. The product proved well suited for studying the binding of tetrahydrobiopterin to nitric-oxide synthase.

Publisher

Portland Press Ltd.

Subject

Cell Biology,Molecular Biology,Biochemistry

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