Affiliation:
1. Институт цитологии Российской Академии наук, Санкт-Петербург
2. Институт цитологии РАН
Abstract
Работа направлена на поиск внеклеточных путей активации актинуправляемых натриевых каналов в клетках лейкемии человека K562. Натриевые каналы по своим характеристикам близки к семейству ENaC, но не обладают чувствительностью к амилориду и его производным. Для исследования действия потенциальных активаторов каналов мы использовали возможности регистрации и анализа унитарных токов при отведении токов от плазматической мембраны всей клетки (whole-cell). В режиме whole-cell показано развитие активности одиночных каналов при разборке актинового цитоскелета в ответ на подачу цитохалазина Д; биофизические свойства каналов проанализированы на уровне унитарных токов. Активацию каналов наблюдали в ответ на добавление в наружный раствор сериновой протеазы трипсина, известного стимулятора активности каналов ENaC почечного эпителия. Функциональные характеристики каналов, активированных разборкой цитоскелета или внеклеточной протеазой, совпадали. Благодаря уникальным особенностям клеточной модели, позволяющей анализировать характеристики одиночных каналов при отведении от плазматической мембраны всей клетки, был выявлен новый путь внеклеточной активации актинуправляемых каналов.
Reference12 articles.
1. Сударикова А. В., Васильева И. О., Морачевская Е. А., Негуляев Ю. А. 2012. Молекулярная и функциональная идентификация натриевых каналов в клетках K562. Цитология. 54 (7) : 573-579. (Sudarikova A. V., Vassilieva I. O., Morachev-
2. skaya E. A., Negulyaev Y. A. 2012. Molecular and functional identification of sodium channels in K562 cells. Cell Tiss. Biol. (Tsitologiya). 6 (5-6) : 435-441.)
3. Diakov A., Bera K., Mokrushina M., Krueger B., Korbmacher C. 2008. Cleavage in the gamma-subunit of the epithelial sodium channel (ENaC) plays an important role in the proteolytic activation of near-silent channels. J. Physiol. 586 : 4587-4608.
4. Haerteis S., Krappitz A., Krappitz M., Murphy J. E., Bertog M., Krueger B., Nacken R., Chung H., Hollenberg M. D., Knecht W., Bunnett N. W., Korbmacher C. 2014. Proteolytic activation of the human epithelial sodium channel by trypsin IV and trypsin I involves distinct cleavage sites. J. Biol. Chem. 289 : 19 067-19 078.
5. Kleyman T. R., Carattino M. D., Hughey R. P. 2009. ENaC at the cutting edge: regulation of epithelial sodium channels by proteases. J. Biol. Chem. 284 : 20 447-20 451.
Cited by
3 articles.
订阅此论文施引文献
订阅此论文施引文献，注册后可以免费订阅5篇论文的施引文献，订阅后可以查看论文全部施引文献