Chemical Dissection of Mammalian cells with Liberation of biologically intact Viruses

Abstract

Ein stark cytolytisch wirkendes Reagenz (10% Natriumdesoxycholat in gesättigter Harnstofflösung in bidest. Wasser) wurde für die Auflösung infizierter Zellkulturen, ohne wesentlichen Verlust an Poliovirus-Titern angewandt. Die Zellysate wurden rasch weiter verdünnt und gegen bidest. Wasser dialysiert, bis zu einer Harnstoff- bzw. Desoxycholat-Konzentration. die nicht mehr zellschädigend wirkt. Ribonuclease-Behandlung solcher Lysate oder Dialysate vermindert die Infektiösität nicht; dieser Befund wird als ein Zeichen der biologischen Integrität der HDC-behandelten Viruspartikeln aufgefaßt. Die Anwendung der Prozedur zur Isolierung des MM-Virus aus Mäusegehirn und infektiöser Nucleinsäure desselben, wurde auch erfolgreich durchgeführt. Ähnlich wurde der lipidhaltige Vaccinevirus durch HDC-Lösung aus Chorioallantois-Membran oder aus HeLa-Zellkulturen in „totaler Ausbeute“ isoliert. Schließlich wurden mit Hilfe der HDC-Methode in arretierte Infektion der HeLa-Zellen logarithmische Mengen von Poliovirus freigesetzt. Diese Tatsache unterstreicht die Anwendungsmöglichkeiten dieser Technik.