Investigation of the Effect of IL-6 Cytokine on Carbonic Anhydrase III Gene Expression in Colon Cancer

Abstract

Yüksek IL-6 seviyeleri, birçok kanser türünde agresif tümör büyümesi ve tedaviye yanıt ile ilişkilidir. Dolaşımdaki IL-6 düzeyi yüksek olan hastalar genellikle kötü prognoz ve daha kısa sağkalım ile ilişkilendirilirken, daha düşük bir IL-6 düzeyi tedaviye daha iyi yanıt ile ilişkilidir. Kolorektal kanser (KRK)’in IL-6 ile regüle olduğu ve KRK hastalarında serum IL-6 seviyesinin arttığı, bu artışında tümör boyutuyla ilişkili olduğu gösterilmiştir. Organizmalarda uygun asit-baz dengesini sağlamada önemli rol oynayan hidrataz aktivitesine sahip olan CAIII bu görevinin dışında reaktif oksijen radikallerinin yok edilmesi ile oksidatif stresin neden olduğu hasardan hücreleri korumada, ayrıca glikolitik ara ürünlerinden oksaloasetatın ve sitratın hızlı dönüşümünü kolaylaştırarak bunların yağ asit metabolizmasına katılmasını da sağlamaktadır. Son yapılan çalışmalarda ise CAIII’ün ve kanser ilişkisi üzerinde durulmaktadır. Karaciğer karsinomda (HCC), CAIII ekspresyonunun önemli derecede azaldığı ve hücrelerin invasyonunu arttırdığı gösterilmiştir. Kolon kanserinde ise CAIII ifadesinin MEK-1 ve PI3K yolakları yoluyla baskılandığı da tespit edilmiştir. Prostat kanserinde de hipoksik yolun regülatör proteini olan HIF1-α'nın doğrudan CAIII promotoruna bağlandığı ve kanser sürecinde aktif rol oynadığı gösterilmiştir. Çalışmamızda IL-6 sitokinin CAIII geni üzerindeki regülasyonu 2 farklı basamakta değerlendirilmiştir. 500 U IL-6 sitokini uygulanan HT-29 hücrelerinde CAIII mRNA seviyesi Real Time PCR ile değerlendirilmiş ve yine 500 U IL-6 uygulanan HT-29 hücrelerinden elde edilen protein ekstraklarının kullanıldığı western blot tekniği ile CAIII protein seviyesi üzerindeki etkisi tespit edilmiştir. Sonuç olarak bu çalışmada IL-6 etkili CAIII regülasyonunda CAIII’ün hem mRNA hem de protein düzeyindeki ifadesinin, IL-6 muamelesi görmemiş kontrol grubu hücrelerine kıyasla azaldığı tespit edilmiştir. Buna göre; IL-6 sitokininin kanser ilgili bir protein olan CA3 üzerindeki düzenleyici etkisi olduğu tespit edilmiştir.