Affiliation:
1. Erciyes Üniversitesi Genom ve Kök Hücre Merkezi
Abstract
Eksozomlar endozomdan köken almış, immün modülasyonda önemli role sahip, hücrelerarası
etkileşimi sağlayan, nano boyutta biyomoleküllerdir. Eksozomlar tetraspanninler, proteinler,
Annexin ve Rab proteinleri gibi çok çeşitli zar proteinlerine sahiptirler ve bu içeriklere sahip
olmaları ile enfeksiyon, sinir sistemi, kanser ve nörodejeneratif hastalıkların tedavi ve teşhisinde
kullanılmaya adaydır. Hemen hemen bütün vücut sıvılarından salınan eksozomların hem homojen
hem de çok sayıda izole edilebilmesi teşhis ve tedavi için önemlidir. Bu nedenle eksozomların
saflaştırılması ve tanıya yönelik spesifik eksozom izolasyonu tedavi amaçlı üretimi açısından önemli
bir basamaktır. Bu çalışmada wharton jel kaynaklı ticari mezenkimal kök hücre kültür besiyerinden
(medyum) farklı izolasyon metotları olan ultrasantrifüj, diferansiyel ultrasantrifüj-filtrasyon ve
çökeltme (presipitasyon) metodu kullanılarak en çok sayıda ve en saf eksozom izolasyonu yapılması
amaçlanmıştır. Eksozomların karakterizasyonu için; görüntülenmesi, saflığı ve boyut analizi her üç
metot için belirlenmiştir. Sonuç olarak ultrasantrifüj metodunda, hem diferansiyel ultrasantrifüjfiltrasyon, hem de presipitasyon metoduna göre çok daha fazla sayıda çok daha küçük boyutta
eksozom izolasyonu olduğu görülmüştür. Diferansiyel ultrasantrifüj-filtrasyon metodu sonucunda
ise eksozom sayısının çok daha az olduğu ancak ultrasantrifüj yöntemi ile elde edilen eksozomlarla
aynı saflıkta olduğu görülmüştür. Eksozomların hemen hemen her hastalığın tedavisinde etkin rol
almalarından dolayı hastalıkların teşhisinde kullanım kolaylığı sağlamakla birlikte iyi biyo-dağılım,
biyouyumluluk ve düşük immünojeniteye sahip olmaları da tedavi aşamasında avantaj sağlayacaktır.