Meme kanseri hücresi tanımlayan biyosensör

Abstract

Amaç: Bu çalışmada meme kanseri hücrelerini membran reseptörleri aracıyla tanımlayabilen yüksek hassasiyet ve özgüllükle çalışan hızlı bir tanı aracı oluşturmak hedeflendi. Kuvars kristal mikrodenge (QCM) sistemi hücrelerin reseptörlerine özgü ligantlarla işlevselleştirilerek etkin bir biyosensör geliştirmek amaçlandı. Gereç ve Yöntem: Biyosensörler afinite prensibiyle çalışan biyoreseptör ve dönüştürücü bölümden oluşan hassas tanı araçlarıdır. Kuvars kristal mikrodenge sistemi kuvars kristal rezonatörünün frekansındaki minimal kütle artışlarına bağlı değişimi saptar. QCM çipi öncelikle hazırladığımız polimerik nanopartiküllerle kaplandı. Nanopartikül tabakasının üzerine transferrin, noç 4 ve her2/neu monoklonal antikoru gibi ligantlar bağlanarak yüzey işlevselleştirildi. Modifiye edilen QCM çip yüzeyinin kimyasal ve fiziksel özellikleri incelendi. İnsan meme kanseri hücreleri MDA-MB 231 ve SKBR3 ile kontrol fibroblast hücreleri L929, kültürde çoğaltılarak deneylere hazırlandı. Hücreler PBS içinde çip yüzeyinden geçirildi ve QCM sisteminde hücre tutunmasına bağlı olarak oluşan frekans değişimleri saptandı. Geliştirilen biyosensör sisteminin bağlanma kinetiği, hassasiyeti ve tekrar kullanılabilirliği belirlendi. Bulgular: QCM çipi kaplamak için hazırlanan nanopartiküllerin çapı 73.22 nm ve polidispersitesi 0.229 olarak bulundu ve yüzeyi homojen bir şekilde kapladıkları gözlendi. Transferrin, noç 4 ve her2/neu monoklonal antikoru ile işlevselleştirilen QCM’in saptama limiti 4-10 hücre/ml olarak saptandı. Bağlanmanın Langmuir tipinde olduğu hesaplandı. Sonuç: Geliştirilen QCM temelli biyosensör meme kanseri hücrelerini reseptörleri aracılığıyla hızlı, hassas ve seçici biçimde tanımladı. Biyosensör tekrarlı kullanımda etkinliğini korudu. Bu hızlı tanı aracının klinik uygulamalarda yer alabileceği sonucuna varıldı.