Effect of Chloralhydrate on Ophrys mammosa Desf. ssp. mammosa (Orchidaceae) Ovules

Abstract

Orkide tohumları şeffaftır ve embriyoları rahatlıkla görünmektedir. Daha evvelki çalışmamızda farklı enzimlerle maserasyon tekniği kullanılarak embriyoların, şeffaf tohumlardan izolasyonu yapılmıştı. Bu yayında ise daha basit bir yöntemle kloralhidrat ve buna benzer farklı şeffaflaştırıcı ve doku genleştirici kimyasallar kullanarak basit embriyo izolasyonu yönteminin oluşturulması amaçlanmıştır. Çalışmada 2 farklı yöntem kullanılmıştır. Birinci yöntemde farklı oranlarda laktikasit, kloralhidrat, fenol, karanfil yağı ve ksilol karışımında dissekte edilmiş orkide ovulleri farklı zamanlarda (24 saat, 48 saat ve 72 saat) bekletilmiştir. Diğer yöntemde ise sadece kloralhidrat eriyiğinde ovuller 24 saat, 48 saat ve 72 saat olmak üzere 3 farklı zaamanda bekletilmiştir. Her iki yöntemde de ovullerden emriyoların hafif bir bastırma ile kolayca çıkıp çıkamadığı test edilmiş ve ayrıca ovullerden baskı ile çıkan embriyoların bütünlüğü ya da parçalı olma durumuna göre yöntemlerin vermliliği birbiri ile karşılaştırılmıştır. Sonuç olarak; sadece kloral hidrat içinde 72 saat bekletilen ovullerden embriyoların rahat izolasyonu ve embriyoların bütünlüğü ve sağlamlığı açısından bu yöntemin daha verimli olduğu tespit edilmiştir. İlaveten bu yöntem ile embriyoların ve süspansör yapılarının çok kolay ve pratik bir şekilde ovullerden çıkışı gözlenmiştir. Ayrıca yöntemin funikulus, plasenta, karpel, megasposorist-arkeosporal hücre ve ovul gelişimi çalışmalarına hız kazandıracağı anlaşılmıştır. Böylece uzun süreçli gömme ve mikrotomda histolojik kesitlere gerek kalmaksızın bazı önemli embriyonal ve süspansör yapılarının pratik ve hızlı bir şekilde incelenebilmesi mümkün olmuştur. Yöntemin faydaları ve yetersiz olduğu noktalar değişik güncel makalaleler eşliğinde tartışılmıştır.