АНАЛИЗ ДИНАМИКИ АКТИВНОСТИ МАТРИКСНЫХ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗ В ПРОЦЕССЕ ХОНДРОГЕННОЙ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ ЛИНИИ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ВАРТОНОВА СТУДНЯ ПУПОЧНОГО КАНАТИКА ЧЕЛОВЕКА, "Цитология"

Abstract

С целью изучения механизмов дифференцировки мезенхимных стволовых клеток (МСК) человека проведено исследование динамики активностей матриксных металлопротеиназ (ММП) 1, 2, 8, 9 и 13, экспрессии маркеров хондрогенеза (коллагена II типа и аггрекана) и некоторых компонентов внеклеточного матрикса (ВКМ) в процессе хондрогенеза клеточной линии MSCWJ-1, выделенной из Вартонова студня пупочного канатика, и изначально представленной монослойной (2D) культурой и клеточными сфероидами (3D). Анализ обоих вариантов линии MSCWJ-1 при культивировании в индукционной среде в течение 21 сут в культуре микромасс показал наличие хондрогенной дифференцировки. Тем не менее в 3D-кyльтyре процесс хондрогенеза был более интенсивным, чем в монослойной (2D) культуре. Сравнительный анализ активности ММП свидетельствует о снижении активности ММП-1, -2 и -9 в процессе дифференцировки, но характер снижения у этих ММП различен. Экспрессия маркеров хондрогенеза (коллагена II типа и аггрекана) значительно увеличивается в процессе дифференцировки в течение 21 сут в 2D- и 3D-вариантах линии MSCWJ-1. Одновременно анализировали содержание в лизатах клеток и кондиционированной среде таких компонентов ВКМ, как коллаген I типа, хондроитинсульфат (ХС) и декорин. При этом количество коллагена I типа и ХС снижалось в процессе дифференцировки, а количество декорина, наоборот, значительно увеличивалось. Показано, что клетки линии MSCWJ-1 при индукции хондрогенной дифференцировки кроме маркеров хондрогенеза синтезируют также коллаген I типа и декорин, что характерно для волокнистого хряща.